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免疫毒性指标有3个:(1)应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,观察中性粒细胞数量;(2)应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,观察巨噬细胞数量(荧光强度);(3)注射红色荧光微球,巨噬细胞吞噬微球排出体外
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斑马鱼药物毒理学评价技术已经通过了美国FDA和欧洲EMA的GLP认证,中国也已将斑马鱼模型的研究列入“重大新药创制”专项。利用斑马鱼进行毒性和安全性评价具有可靠、快速的优点,能同时看到各个器官的影响。
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【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。
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骨密度几乎由骨骼中钙含量来反映,应用特异性地结合钙的荧光染料染色(呈绿色),用其荧光强度可反映骨密度。斑马鱼骨骼染色后经荧光显微镜采集到的荧光强度能够客观反映骨密度。
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服用一段时间供试品后,将斑马鱼固定、脱水、包埋、切片,进行H&E染色,我们观察斑马鱼各组织脏器结构病理变化。
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经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗炎药组侧线上中性粒细胞数量与正常对照组数量相当,未出现模型对照组中性粒细胞募集情况,且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调
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实验结束后,以各浓度组织器官反应及死亡情况的统计学分析结果评价药物对斑马鱼的毒性,并对典型毒性器官进行拍照。
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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼毛细胞明显减少,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有听毒性。
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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用燃脂产品组卵黄囊荧光强度与正常对照组比较明显减弱。2.本实验证实了白藜芦醇具有明显燃脂(促进脂肪代谢)功效。
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